連接酶鏈反應(yīng)（ligase chain reaction,LCR）是繼PCR后，新出現(xiàn)的一種更加完善的DNA體外擴(kuò)增和檢測(cè)技術(shù)。在檢測(cè)點(diǎn)突變等方面具有*的優(yōu)點(diǎn)。 （一） LCR的原理 該技術(shù)是利用DNA連接酶構(gòu)建共價(jià)磷酸鍵，特異地連接雙鏈DNA，經(jīng)加熱變性、退火和連接等步驟后，再多次反復(fù)循環(huán)，從而使目的DNA得以大量擴(kuò)增。 （二） LCR的主要用途 主要用途有以下三個(gè)方面。 1. 單堿基突變遺傳病的檢測(cè) 該技術(shù)在識(shí)別點(diǎn)突變方面優(yōu)于PCR，該技術(shù)首先用于單堿基突變遺傳病的診斷；據(jù)報(bào)道已用LCR識(shí)別了鐮狀細(xì)胞貧血患者珠蛋白基因發(fā)生的A→T替換。 2. 病原微生物的檢測(cè)可用于李氏桿菌、結(jié)核桿菌、淋球菌及沙眼衣原體等病原微生物種及亞種的鑒別。 3. 定向誘變LCR法能連接PCR擴(kuò)增片段，進(jìn)行多位點(diǎn)同時(shí)定向誘變，或隨機(jī)設(shè)計(jì)，因而是一種有效的基因改建和構(gòu)造方法。 總之， LCR設(shè)計(jì)*，在某些方面特別是檢測(cè)點(diǎn)突變方面是有優(yōu)勢(shì)的，目前尚不能為其他手段取代，它作為一種DNA擴(kuò)增和檢測(cè)技術(shù)，具有很大的發(fā)展前景 |
