單克隆抗體的特性 單克隆抗體的問(wèn)世，是生物技術(shù)領(lǐng)域劃時(shí)代的飛躍，促進(jìn)相關(guān)學(xué)科的迅速發(fā)展與傳統(tǒng)的多克隆抗體相比有*的優(yōu)勢(shì)，但也存在一些不足之處。 （一）單克隆抗體的特性 1．高度特異性 單克隆抗體只針對(duì)一個(gè)表位，一個(gè)表位一般只有4一7個(gè)氨基酸，故單克隆抗體發(fā)生交叉反應(yīng)的機(jī)會(huì)很少，即高度特異性。但這種專一性也不是的。在相似的抗原之間，其特異性具有濃度依賴性，即當(dāng)抗體的濃度達(dá)到一定的程度后，其特異性可有所降低。單克隆抗體用于免疫酶染色、免疫熒光分析、放射免疫分析以及酶聯(lián)免疫吸附分析時(shí)，其反應(yīng)強(qiáng)度不如多克隆抗體，但其特異性優(yōu)于多克隆抗體。此外，應(yīng)用單克隆抗體時(shí)對(duì)抗原的保存要求也更加嚴(yán)格。例如，某些固定方法可使抗原的特定表位失去抗原性而產(chǎn)生陰性結(jié)果。 2．高度的均一性和可重復(fù)性 單克隆抗體是由單個(gè)細(xì)胞株產(chǎn)生的均一性抗體。只要長(zhǎng)期保持雜交瘤細(xì)胞的穩(wěn)定性，不發(fā)生突變，就可以長(zhǎng)期獲得同質(zhì)的單克隆抗體，單克隆抗體僅具有單一的生物功能。 3．弱凝集反應(yīng)和不呈現(xiàn)沉淀反應(yīng) 單克隆抗體與抗原反應(yīng)（除非抗原上有較多的同一表位）不呈現(xiàn)沉淀反應(yīng)，這是因?yàn)榭箚我豢乖瓫Q定簇表位的單克隆抗體不易形成三維晶格結(jié)構(gòu)之故。由于單克隆抗體對(duì)細(xì)胞的凝集作用較多克隆抗體弱，所以單克隆抗體的細(xì)胞毒作用也較弱。其細(xì)胞毒作用不僅取決于單克隆抗體的種類，而且取決于抗原決定簇在細(xì)胞表面的分布。兩種或兩種以上的單克隆抗體可使細(xì)胞表面的抗原表位集中，并使其細(xì)胞毒的作用加強(qiáng)。 4．對(duì)環(huán)境敏感性 單克隆抗體易受環(huán)境的pH、溫度和鹽類濃度的影響，使其活性降低甚至喪失，但單克隆抗體遇熱后的聚合作用很低。已證明56~C、5min可使單克隆抗體失活，小鼠血清可能有一定的保護(hù)作用，兩種單克隆抗體的混合物也可使其耐熱性加強(qiáng)?？傊?，單克隆抗體越純對(duì)溫度越敏感，而雜蛋白及其他抗體分子可使單克隆抗體的耐熱性增強(qiáng)。單克隆抗體受pH的影響較多克隆抗體明顯，其*的pH為6～8，而且抗體越純對(duì)pH越敏感。低濃度的NaCl對(duì)單克隆抗體可能有一定的保護(hù)作用。 （二）單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)與局限性 單克隆抗體和多克隆抗體各有其優(yōu)點(diǎn)和局限性，只有對(duì)它們有全面的了解，才能根據(jù)不同應(yīng)用領(lǐng)域的要求，正確地選擇和應(yīng)用。 1．單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn) （1）雜交瘤可以在體外“*”地存活并傳代，只要不發(fā)生細(xì)胞株的基因突變，就可以不斷地生產(chǎn)高特異性、高均一性的抗體。 （2）可以用相對(duì)不純的抗原，獲得大量高度特異的、均一的抗體。 （3）由于可能得到“無(wú)*”的均一性抗體，所以適用于以標(biāo)記抗體為特點(diǎn)的免疫學(xué)分析方法，如IRMA和ELISA等。 （4）由于單克隆 抗體的高特異性和單一生物學(xué)功能，可用于體內(nèi)的放射免疫顯像和免疫導(dǎo)向治療。 2．單克隆抗體的局限性 （1）單克隆抗體固有的親和性和局限的生物活性限制了它的應(yīng)用范圍。由于單克隆抗體不能進(jìn)行沉淀和凝集反應(yīng)，所以很多檢測(cè)方法不能用單克隆抗體完成。 （2）單克隆抗體的反應(yīng)強(qiáng)度不如多克隆抗體。 （3）制備技術(shù)復(fù)雜，而且費(fèi)時(shí)費(fèi)工，所以單克隆抗體的價(jià)格也較高。 |
